La tecnica del test di immunoassorbimento enzimatico legato – in inglese Enzyme-Linked Immuno Assay – o test ELISA è un test immunologico che consente la rilevazione o il dosaggio di molecole in un campione biologico. È stato concettualizzato e sviluppato da due scienziati svedesi, Peter Perlmann ed Eva Engvall all'Università di Stoccolma nel 1971.

Le molecole saggiate con il metodo ELISA sono generalmente proteine. E i tipi di campioni includono materiali biologici fluidi - plasma, siero, urina, sudore -, terreni di coltura cellulare o una proteina ricombinante - proteina prodotta da una cellula il cui materiale genetico è stato alterato dalla ricombinazione genetica - purificata in soluzione.

Il test ELISA viene utilizzato principalmente in immunologia per rilevare e/o misurare la presenza di proteine, anticorpi o antigeni in un campione. Questo test sierologico rileva in particolare gli anticorpi prodotti dall'organismo in risposta alla contaminazione virale.

L'utilizzo degli anticorpi per la diagnosi delle malattie infettive rappresenta un metodo specifico e rapido. La tecnica ELISA è una tecnica immunoenzimatica che permette di visualizzare, a partire da un campione biologico, le reazioni tra un antigene – un corpo considerato estraneo dall'organismo vivente – e un anticorpo mediante una reazione cromatica prodotta da un marcatore enzimatico – generalmente fosfatasi alcalina e perossidasi – precedentemente attaccate all'anticorpo. La reazione cromatica conferma l'identificazione del batterio isolato o la presenza del virus desiderato e l'intensità del colore fornisce un'indicazione della quantità di antigeni o anticorpi nel campione dato.

Esistono quattro tipi principali di test ELISA:

• ELISA diretta, consente di rilevare o misurare gli anticorpi. Utilizza solo un anticorpo primario;
• ELISA indiretta, il più utilizzato, consente anche di rilevare o dosare gli anticorpi. Utilizza un anticorpo secondario che gli conferisce una migliore sensibilità rispetto all'ELISA diretto;
• ELISA in gara, permette il dosaggio degli antigeni. Prodotto dalla competizione per i legami, non utilizza un enzima;
• ELISA «nel panino», permette il dosaggio degli antigeni. Questa tecnica è comunemente usata nella ricerca.

Il test ELISA è utilizzato per:

• Trovare e misurare gli anticorpi in sierologia per la diagnosi di malattie infettive: virologia, parassitologia, batteriologia, ecc.;
• Dosare proteine ​​a basse concentrazioni: dosaggi specifici di alcune proteine ​​plasmatiche (immunoglobulina E (IgE), ferritina, ormoni proteici, ecc.), marker tumorali, ecc.;
• Dosare piccole molecole: ormoni steroidei, ormoni tiroidei, farmaci…

Il test ELISA viene utilizzato in particolare per diagnosticare molte malattie infettive:

Malattie a trasmissione sessuale (MST)

Compresi epatite, sifilide, clamidia e HIV. Raccomandato dalle autorità sanitarie, è il principale test di screening dell'AIDS: mostra la presenza di anticorpi anti-HIV e dell'antigene p24 sei settimane dopo l'infezione.

Malattie regionali o endemiche

Febbre gialla, malattia da virus di Marburg (MVM), Ladengue, malattia di Lyme, Chikungunya, febbre della Rift Valley, Ebola, febbre di Lassa, ecc.

Il Covid-19

Da effettuarsi oltre le 2 o 3 settimane dopo l'insorgenza dei sintomi, il test ELISA permette di identificare, in meno di un'ora, la presenza di anticorpi anti-SARS-CoV-2.

Patogeni virali che causano infezioni prenatali

Toxoplasmosi, rosolia, citomegalovirus, herpes simplex per esempio.

Altri casi

Ma ha anche trovato applicazioni nel rilevamento:

• gravidanze;
• Malattie autoimmuni;
• Allergeni alimentari: la determinazione quantitativa delle immunoglobuline totali E (IgE) aiuta nella valutazione e nel trattamento delle allergie;
• Disturbi ormonali;
• Marcatori tumorali;
• Virus delle piante;
• E molti altri

Nell'ambito della rilevazione degli anticorpi anti-SARS-CoV-2, uno studio pilota condotto nell'agosto 2020 dall'Institut Pasteur, dal CNRS, dall'Inserm e dall'Università di Parigi conferma l'affidabilità del test ELISA: entrambi i test ELISA testati utilizzano l'intera proteina N di SARS-CoV-2 (ELISA N) o il dominio extracellulare del picco del virus (S) come antigeni bersaglio. Questa tecnica permetterebbe di identificare gli anticorpi in più del 90% dei casi, con un tasso di falsi positivi molto basso dell'1%.

Effettuati nei laboratori di analisi su prescrizione medica, i test Elisa costano circa 10 euro e sono rimborsati al 100% dall'Assicurazione Sanitaria.

Effettuati in centri di informazione, screening e diagnostica gratuiti (CeGIDD), possono essere gratuiti per HIV e SARS-CoV-2.